骑士小说

第203章 孙教授 打不过能加入吗（第3页）

“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀，第一次加氯仿离心后，吸取上清液，移入新的离心管，再加一次等体积的氯仿进行第二次离心，这样可以最大限度去除蛋白污染，浓度不够的问题，就在加异丙醇沉淀前，补5微升5mgml的糖原作为共沉淀剂。”

杨煦连连点头。

半小时后，两人提着一袋橘子，来到学校实验室。

听到推门声，众人抬起头。

“杨主任？”

“老大？”

“来来来，大家先停一下手里的活，休息十分钟。”杨煦热情地招呼着，“这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘，尝尝，甜得很。”

众人闻言，纷纷围了过来。

王晓晴也拿起一个橘子剥开。

杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。

随口说道：

“我看你们这进度，是在做rna提取的最终洗涤吧？”

王晓晴点头：“嗯，江河刚定下的方案，这批是用双重氯仿法跑的，还在等离心结果。”

“双重氯仿法，是个好思路。”

杨煦道：“血清样本和组织样本不一样，trizol试剂用在血清上，最大的痛点就是蛋白含量超标，你们在吸取水相上清液的时候，稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来，这会导致下游逆转录直接失败。”

“所以，牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的，把第一次吸出的上清液，再加一次等体积的氯仿，剧烈震荡后进行二次离心，这样一来，蛋白杂质基本就被洗干净了。”

几个学生都纷纷点头。

杨教授不愧厉害。

说的跟江河说的一模一样。

王晓晴也有些意外地看向杨煦：

“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究？”

杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧？”

王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“确实。”

“5微升，5mgml的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”

“对的对的。”

王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。

杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。

他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。

江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。

——想装就装吧，谁让你是我老师呢。

休息时间结束。

实验重新运转。

接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。

王晓晴准备亲自操作移液枪。

杨煦在她旁边轻声提醒，美其名曰指导：

“王教授，样本沉淀物很小，洗涤的时候，枪头最好贴着管壁对侧下去。”

“我知道。”